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多克隆抗体制备

1.抗肽多克隆抗血清制备（淘普生物合成抗原)

服务内容

交付

周期

a.多肽合成(少于15个氨基酸，纯度大于85%，10mg)
b.C末段或N末段半胱氨酸偶联KLH
c.两只新西兰大白兔，每只均经过4次免疫
d. 100~120ml抗血清
e. ELISA检测，效价》1:100000

A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.100~120ml抗血清
D.5mg未偶联多肽，MS和HPLC报告

多肽合成:2周
偶联:1周
免疫:10周
ELISA和运输:1~2周
总计:14~15 周

2.抗原亲和纯化多克隆抗体制备（客户提供抗原)

服务

多肽抗原

蛋白抗原

服务内容

a.偶联KLH
b.两只新西兰大白兔,每只均经过4次免疫
c.最终采血
d.多肽抗原偶联亲和树脂e.抗原亲和纯化
f.ELISA检测，效价》1:100000
g.客户提供抗愿: 7.5~8mg多肽(2.5~3mg用于免疫,5mg用于纯化)

a.SDS-PAGE核查蛋白
b.两只新西兰大白兔,每只均经过4次免疫
c.最终采血
d.蛋白偶联亲和树脂(如有需要可用PBS透析)
e.抗原亲和纯化
f.ELISA检测,效价》1:100000
g.客户提供抗原: 7.5~8mg蛋白(2.5~3mg）用于免疫,5mg用于纯化)浓度>0.4 mg/ml,缓冲液中不含有机溶剂,不要用Tris或其它含氮基的缓冲液

交付

A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.3~5mg 纯化抗体
D.剩余抗原

A.lml 免疫前血清
B.ELISA 结果，效价》1:100000
C.3~5mg 纯化抗体
D.剩余抗原

周期

偶联:1 周
免疫:10 周
纯化:1 周
ELISA 和运输:1~2 周
总计:13~14 周

蛋白核查:1 周
免疫10 周
纯化:1 周
ELISA 和运输:1~2 周
总计:13~14 周

单克隆抗体制备

2.2 蛋白表达

第一阶段：免疫小鼠

设计实验方案

客户有特殊需求，需提供详细的实验要求

2工作日

抗原合成及偶联

单克隆细胞株制备公司合成抗原

2-3周

免疫实验动物

5只6-8周龄BALB/C小鼠，Elisa检测即时效价

7-8周

Elisa检测

以免疫原为抗原样品，保证Elisa检测效价1：10000以上

1周

第二阶段：单克隆杂交瘤细胞株的建立

细胞融合

取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选阳性克隆